柴胡皂苷-d 通過誘導細胞凋亡和細胞周期停滯來抑制人類未分化甲狀腺癌細胞的增殖。[Pubmed：25268087 ]

歐洲醫學藥理學評論。2014；18（17）：2435-43。

柴胡皂苷D是從柴胡中提取的三萜皂苷，具有抗菌、抗病毒、抗癌等多種藥理作用。本研究旨在探討柴胡皂苷D對人未分化甲狀腺癌增殖和凋亡的影響。
方法與結果：在柴胡皂苷D
存在下培養三種人未分化甲狀腺癌細胞系，并用MTT分析法測量其增殖。用流式細胞術分析細胞凋亡和細胞周期分布。進行蛋白質印跡法測定蛋白質表達。用動物模型測量柴胡皂苷D的體內作用。體外MTT分析顯示柴胡皂苷D治療抑制了三種人未分化甲狀腺癌細胞系ARO、8305C和SW1736的細胞增殖。此外，流式細胞分析顯示，柴胡皂苷 D促進細胞凋亡并誘導 G1 期細胞周期停滯。在分子水平上，我們的結果表明，柴胡皂苷-d 治療增加了 p53 和 bax 的表達，并降低了 Bcl-2 的表達。此外，柴胡皂苷-d 給藥導致 p21 顯著上調，CDK2 和細胞周期蛋白 D1 下調。異種移植腫瘤發生模型表明，柴胡皂苷 D顯著降低了體內甲狀腺腫瘤的重量和體積。 結論： 本研究表明，柴胡皂苷 D可能通過誘導細胞凋亡和細胞周期停滯成為人類未分化甲狀腺癌的一種新的強效化學預防藥物候選物。
 

柴胡皂苷 a 及其差向異構體柴胡皂苷 d 通過抑制 NF-κB 信號通路的激活發揮抗炎活性。[Pubmed：22728095 ]

Int. Immunopharmacol.，2012年9月；14（1）：121-6。

柴胡皂苷 a (SSa) 及其差向異構體柴胡皂苷 D (SSd) 是柴胡中的主要三萜皂苷衍生物，柴胡長期以來一直被用作中藥，用于治療各種炎癥相關疾病。
方法與結果：
本研究在脂多糖 (LPS) 誘導的 RAW264.7 細胞中研究了 SSa 和 SSd 的抗炎活性及其潛在機制。結果表明，SSa 和 SSd 均顯著抑制 LPS 誘導的 RAW264.7 細胞中誘導型一氧化氮合酶 (iNOS) 和環氧合酶-2 (COX-2) 的表達，最終導致一氧化氮 (NO) 和前列腺素 E(2) (PGE(2)) 減少。此外，在 RAW264.7 細胞中，用 SSa 或 SSd 處理可劑量依賴性地抑制 LPS 誘導的主要促炎細胞因子：腫瘤壞死因子-α (TNF-α) 和白細胞介素-6 (IL-6) 的產生。進一步分析表明，SSa 和 SSd 均可抑制 LPS 誘導的 RAW264.7 細胞中核因子-κB (NF-κB) 從細胞質易位到細胞核。此外，SSa 和 SSd 在兩種不同的小鼠急性炎癥模型、角叉菜膠誘導的大鼠爪水腫和乙酸誘導的小鼠血管通透性中表現出顯著的抗炎活性。
結論：
總之，SSa 和 SSd 通過抑制 NF-κB 活化從而抑制 iNOS、COX-2 和促炎細胞因子而表現出強大的抗炎活性。

Saikosaponin-d 是一種新型 SERCA 抑制劑，可誘導凋亡缺陷細胞中的自噬細胞死亡。[Pubmed：23846222 ]

柴胡皂苷 D 通過調節線粒體 GR 易位和 GR 依賴性途徑抵抗皮質酮誘導的細胞凋亡。[Pubmed：24636912 ]

Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry。2014 年 8 月 4 日；53：80-9。

柴胡皂苷D是糖皮質激素受體（GR）的激動劑，我們初步研究表明它在皮質酮處理的PC12細胞中具有神經保護作用。但這種神經保護作用的分子機制尚不清楚，還需要進一步的證據。本研究旨在進一步研究柴胡皂苷D在皮質酮處理的PC12細胞中的細胞保護效率和潛在作用機制。
方法與結果：在有或沒有柴胡皂苷D
的情況下，用250μM皮質酮處理細胞24小時；然后測定細胞活力，并進行Hoechst 33342/碘化丙啶（PI）和膜聯蛋白/PI雙染色和TUNEL染色。接下來，研究了 mPTP、MMP、[Ca(2+)]i、GR 易位至細胞核以及 caspase-3、caspase-9、細胞色素 C、GR、GILZ、SGK-1、NF-Κb (P65)、IκB-α、Bad、Akt、Hsp90 和 HDAC-6 的蛋白質印跡分析。通過 Hoechst 33342/PI、annexin/PI 和 TUNEL 染色試驗進一步證實了柴胡皂苷 D的神經保護作用。這些額外的數據表明，柴胡皂苷 D通過抑制 GR 易位至線粒體、恢復線粒體功能、下調促凋亡相關信號事件的表達和上調抗凋亡相關信號事件，部分逆轉了皮質酮引起的生理變化。結論：這些發現表明，SSD 通過差異調節線粒體和核 GR 易位、部分逆轉線粒體功能障礙、抑制線粒體凋亡途徑和選擇性激活 GR 依賴性存活途徑表現出其抗凋亡作用。
 

Cell Death Dis. 2013 年 7 月 11 日；4：e720。

自噬是一種重要的細胞過程，它通過循環利用營養物質來維持細胞能量水平，從而通過蛋白質和受損細胞器的周轉來維持細胞的存活，從而控制細胞處于正常的穩態。然而，持續激活自噬會導致細胞器和必需蛋白質的過度消耗，從而導致 caspase 不依賴的自噬性細胞死亡。因此，通過這種自噬機制誘導細胞死亡可能是治療癌癥的另一種方法。
方法和結果：
最近，我們從一種藥用植物中發現了一種新型自噬誘導劑Saikosaponin D (Ssd)，它通過形成自噬體（以 GFP-LC3 斑點形成為衡量標準）誘導各種癌細胞中的自噬。通過計算虛擬對接分析、生化分析和先進的活細胞成像技術，Ssd 被證明可以通過直接抑制肌漿/內質網 Ca(2+) ATPase 泵來增加細胞內鈣離子水平，從而通過激活 Ca(2+)/鈣調蛋白依賴性激酶激酶-AMP 活化蛋白激酶-哺乳動物雷帕霉素靶蛋白途徑來誘導自噬。此外，Ssd 治療會導致鈣穩態破壞，從而誘導內質網應激以及未折疊蛋白反應途徑。Ssd 還被證明是一種有效的細胞毒性劑，可以殺死凋亡缺陷或抗凋亡的小鼠胚胎成纖維細胞，這些細胞要么缺乏 caspases 3、7 或 8，要么具有 Bax-Bak 雙敲除。
結論：
這些結果詳細闡述了 Ssd 作為一種新型自噬誘導劑的作用機制，具有開發成為針對抗凋亡癌細胞的抗癌劑的潛力。

柴胡皂苷-D通過增加抗氧化酶和HSP72的表達來減輕LLC-PK1細胞中熱應激誘導的氧化損傷。[Pubmed：25169909 ]

《中國醫學雜志》。 2014；42(5)：1261-77。

熱應激會刺激活性氧 (ROS) 的產生，從而導致腎臟氧化損傷。本研究闡明了從柴胡根中提取的柴胡皂苷 D (SSd) 保護熱應激豬腎近端小管 (LLC-PK1) 細胞免受氧化損傷的機制。經 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物 (MTT) 測定證明，單獨的 SSd 在 1 或 3 μg/mL 濃度下不具有細胞毒性。為了評估 SSd 對熱應激誘導的細胞損傷的影響，LLC-PK1 細胞用不同濃度的 SSd 預處理，在 42°C 下熱應激 1 小時，然后恢復到 37°C 9 小時。DNA 階梯和 MTT 測定證明，與未經處理的細胞相比，SSd 有助于防止熱應激誘導的細胞損傷。此外，與對照組相比，用 SSd 預處理可增加超氧化物歧化酶 (SOD)、過氧化氫酶 (CAT) 和谷胱甘肽過氧化物酶 (GPx) 的活性，但以劑量依賴性方式降低丙二醛 (MDA) 的濃度。此外，實時 PCR 和蛋白質印跡分析表明，SSd 在 mRNA 和蛋白質水平上顯著增加了銅和鋅超氧化物歧化酶 (SOD-1)、CAT、GPx-1 和熱休克蛋白 72 (HSP72) 的表達。
結論：
總之，這些結果首次證明 SSd 通過調節 LLC-PK1 細胞中抗氧化酶和 HSP72 的活性來改善熱應激引起的氧化損傷。

柴胡皂苷 d 通過抑制 NF-κB 和 STAT3 信號傳導來防止對乙酰氨基酚引起的肝毒性。[Pubmed：25265579 ]

Chem Biol Interact.2014 年 9 月 27 日；223C：80-86。

過量服用對乙酰氨基酚 (APAP) 可導致急性肝損傷，有時甚至會致命，需要有效的藥物干預。傳統中藥柴胡在東亞國家被廣泛用于治療多種肝病，柴胡皂苷 D (SSd) 是其主要藥理活性成分之一。然而，柴胡或 SSd 對 APAP 毒性的療效仍不清楚。
方法和結果：
C57/BL6 小鼠腹膜內每天注射一次 SSd，連續 5 天，然后進行 APAP 刺激。生化和病理分析顯示，用 SSd 治療的小鼠可免受 APAP 誘導的肝毒性。 SSd 顯著抑制了核因子 κB (NF-κB) 和信號轉導和轉錄激活因子 3 (STAT3) 的磷酸化，并逆轉了 APAP 誘導的 NF-κB 靶基因（如促炎細胞因子 Il6 和 Ccl2）和 STAT3 靶基因（如 Socs3、Fga、Fgb 和 Fgg）的增加。SSd 還增強了抗炎細胞因子 Il10 mRNA 的表達。總之，這些結果表明 SSd 主要通過下調 NF-κB 和 STAT3 介導的炎癥信號傳導來保護小鼠免受 APAP 誘導的肝毒性。
結論：
本研究揭示了柴胡和/或 SSd 引起的保肝作用的可能機制之一。