產品描述
IPTG是一種極強的誘導劑，不被細菌代謝而且十分穩定，X-gal為生色底物，二者共同用于藍白斑篩選。IPTG可誘導載體lac操縱子DNA區段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，該片段可與宿主細胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實現基因內互補 (α互補)。實現α互補的細菌暴露IPTG，鋪在含有X-gal生色底物的培養基上，可形成藍色菌落。外源DNA插入質粒的多克隆位點后可破壞α互補作用,將產生白色菌落。IPTG常用于需要誘導β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與X-Gal或Bluo-Gal結合使用，用于重組細菌菌落的藍白篩選，這些菌落可以誘導lac操縱子在大腸桿菌中的表達。IPTG與lac I阻遏蛋白結合并改變其構象而發揮作用，防止β-半乳糖苷酶編碼基因lacZ的抑制。
保存方式
2-8℃保存，有效期5年。
產品性質
CAS：367-93-1
分子式：C9H18O5S
分子量： 238.30
外觀：白色粉末
純度：≥ 99%
溶解性：50 mg/mL Water
操作說明
儲存液配制
1）用去離子水配制0.1 M的儲存液；
2）用5-10 mL去離子水潤濕0.22 μm針孔過濾，0.22μm濾膜除菌上述IPTG溶液。分裝成1 mL，-20℃凍存，有效期可達1年。
藍白斑篩選
1. X-Gal、IPTG加入瓊脂培養基溶液
1）高壓滅菌已加瓊脂的培養基，并冷卻到50℃左右。
2）每毫升培養基內加入10 μL 20 mg/mL X-Gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其終濃度達到1 mM）；
3）加入適量抗生素；
4）混勻后按照平板大小倒入適量培養基，待培養基冷卻至室溫后，接種細菌于37℃過夜培養。
2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面
1）于無菌超凈工作臺制備平板（如LB瓊脂板）；
2）取40 μL 0.1 M IPTG和120 μL 20 mg/mL X-Gal混合，均勻涂于準備好的平板上；
注意：平板邊緣較難充分涂均勻，容易產生假陽性，因此為了得到更好結果，建議后續操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。
3）37℃孵育直至所有液體被吸收（30 min或更長）。接種細菌于37℃過夜培養直到菌落形成。
